|
| 產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-P63514 |
| 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 蠟樣芽孢桿菌腹瀉型和嘔吐型毒素基因核酸檢測(cè)試劑盒（定性） | 50T | BK-P63514 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝，確保即使在低濃度樣本中也能準(zhǔn)確檢測(cè)。
操作簡(jiǎn)便：試劑盒采用即開(kāi)即用的設(shè)計(jì)，用戶只需提供樣品DNA模板即可進(jìn)行檢測(cè)。
特異性強(qiáng)：引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化，針對(duì)蠟樣芽孢桿菌毒素基因（如cesB基因）的高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，避免與其他生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
快速檢測(cè)：整個(gè)檢測(cè)過(guò)程可在60分鐘內(nèi)完成，適用于快速診斷。
適用范圍廣：既可用于定性檢測(cè)，也可用于定量檢測(cè)。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
| CoC1人細(xì)胞 | 無(wú)糖DMEM培養(yǎng)基，含L-谷氨酰胺，不含丙酮酸鈉 |
| COLO205人細(xì)胞 | 低糖DMEM培養(yǎng)基，含L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉 |
| COLO320人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | 高糖DMEM培養(yǎng)基，含L一谷氨酰胺，不含丙酮酸鈉 |
| COLO320 DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | 高糖DMEM培養(yǎng)基，含L一谷氨酰胺和HEPES，不含丙酮酸鈉 |
| COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | 高糖DMEM培養(yǎng)基，含L一谷氨酰胺和HEPES,無(wú)丙酮酸鈉和酚紅 |
| COV434人卵巢顆粒細(xì)胞 | 高糖減血清DMEM培養(yǎng)基，含非之需氨基酸和丙酮酸鈉，不含L-谷氨酰胺 |
| CW-2人細(xì)胞 | DMEM/F-12（1:1）培養(yǎng)基，含L一谷氨酰胺和HEPES |
| cx-1細(xì)胞 | DMEM/F-12（1:1）培養(yǎng)基，含L一谷氨酰胺，不含HEPES |
| D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | 減血清DMEM/F-12（1： 1）培養(yǎng)基，含非必需氨基酸和丙酮酸鈉，不含L一谷氨酰胺 |
| D341 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | DMEM/F-12（1: 1）培養(yǎng)基，含L一谷氨酰胺， 500 mL 丙酮酸鈉和HEPES，不含酚紅 |
| DAMI人巨核細(xì)胞細(xì)胞 | 蠟樣芽孢桿菌腹瀉型和嘔吐型毒素基因核酸檢測(cè)試劑盒（定性）減血清 DMEM/F-12（1：1）培養(yǎng)基，含酚紅，不含L一谷氨酰胺和HEPES |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
